ДЕТЕКЦІЯ МАРКЕРІВ Р16/KI-67ПРИ ВИЯВЛЕННІ ІНТРАЕПІТЕЛІАЛЬНОЇ НЕОПЛАЗІЇ ШИЙКИ МАТКИ
DOI: 10.17721/1728.2748.2023.95.24-31
Ключові слова:
дисплазія шийки матки, внутрішньоепітеліальний рак, імуноцитохімія, ПАП-тест, р16/Кі-67, класифікація Бетесда, вірус папіломи людини.Анотація
В с т у п . За останні роки в Україні було виявлено несприятливу епідеміологічну ситуацію щодо захворювань, які передаються статевим шляхом. Однією із найпоширеніших є генітальна папіломовірусна інфекція. Наразі отримано переконливі результати досліджень, які підтверджують, що вірус папіломи людини (ВПЛ) є однією із причин виникнення злоякісних трансформацій шийки матки. Вивчення молекулярного патогенезу асоційованих із ВПЛ новоутворень дозволило знайти біомаркери, які допомагають діагностувати інтраепітеліальну неоплазію шийки матки HSIL (High-grade Squamous Intraepithelial Lesion). Включення біомаркерів p16/Кi-67 у дослідження дає можливість підвищити чутливість виявлення HSIL у жінок. Також актуальним є подальший аналіз ефективності використання додаткової напівкількісної шкали для оцінювання результатів імуноцитохімічного виявлення p16/Кi-67.
М е т о д и . Дослідження проводили на мазках із шийки матки, зроблених із використанням методики рідинної цитології з подальшим фарбуванням за Папаніколау, виявленням ВПЛ, імуноцитохімічним фарбуванням антитілами проти р16/Кі-67. Вибірку становили 90 жінок, які були поділені на 3 групи за віком. У кожній групі їх поділяли за такими критеріями: наявність / відсутність ВПЛ, ступінь дисплазії за класифікацією Бетесда й негативний / позитивний результат на р16/Кі-67 з подальшим розподілом інтенсивності фарбування за бальною шкалою у відповідній локалізації позитивної реакції у ядрі або цитоплазмі.
Р е з у л ь т а т и . Виявлення під час дослідження імуноцитохімічних маркерів р16 та Кі-67 дозволило виокремити жінок з інтраепітеліальними ураженнями за позитивного результату ВПЛ і відсутності диспластичних змін у ПАП-тесті, а також при сортуванні спірних результатів ПАП-тесту. Показано, що інтенсивність імуноцитохімічного забарвлення р16 та Кі-67 змінювалась у прямій залежності від виявленого ступеня дисплазії.
В и с н о в к и . Виявлено прямий взаємозв'язок ступеня тяжкості дисплазії, установленого за класифікацією Бетесда, та інтенсивністю імуноцитохімічного забарвлення р16 та Кі-67. Отримані результати дають змогу надалі вивчати інтенсивність забарвлення при виявленні імуноцитохімічних маркерів р16 та Кі-67 задля їхнього попереднього застосування у комплексній інтерпретації результатів ПАП-тесту й виявлення точного ступеня дисплазії у неодноз- начних діагностичних зразках.
Посилання
Cuschieri K, Wentzensen N. (2008). Human papillomavirus mRNA and p16 detection as biomarkers for the improved diagnosis of cervical neoplasia. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 17(10), 2536-2545. https://doi.org/10.1158/1055-9965.epi-08-0306
Gupta, S. M., Warke, H., Chaudhari, H., Mavani, P., Katke, R. D., Kerkar, S. C., & Mania‐Pramanik, J. (2022). Human Papillomavirus E6/E7 oncogene transcripts as biomarkers for the early detection of cervical cancer. Journal of Medical Virology, 94(7), 3368-3375. https://doi.org/10.1002/jmv.27700
Celewicz, A., Celewicz, M., Wężowska, M., Chudecka-Głaz, A., Menkiszak, J., & Urasińska, E. (2018). Clinical efficacy of p16/Ki-67 dual-stained cervical cytology in secondary prevention of cervical cancer. Polish Journal of Pathology, 69(1), 42-47. https://doi.org/10.5114/pjp.2018.75335
Dovnik, A., & Repše Fokter, A. (2023). The Role of p16/Ki67 Dual Staining in Cervical Cancer Screening. Current Issues in Molecular Biology, 45(10), 8476-8491. https://doi.org/10.3390/cimb45100534
El‐Zein, M., Gotlieb, W., Gilbert, L., Hemmings, R., Behr, M. A., Franco, E. L., & STAIN‐IT Study Group. (2021). Dual staining for p16/Ki‐67 to detect high‐grade cervical lesions: Results from the Screening Triage Ascertaining Intraepithelial Neoplasia by Immunostain Testing study. International Journal of Cancer, 148(2), 492-501. https://doi.org/10.1002/ijc.33250
Frappart L, Fontaniere B, Lucas E, Sankaranarayanan R, (2004) Histopathology and Cytopathology of the Uterine Cervix - Digital Atlas, IARC CancerBase No. 8, WHO, https://screening.iarc.fr/atlascyto.php
Han, C., Zhao, F., Wan, C., He, Y., & Chen, Y. (2020). Associations between the expression of SCCA, MTA1, P16, Ki 67 and the infection of high risk HPV in cervical lesions. Oncology Letters, 20(1), 884-892. https://doi.org/10.3892/ol.2020.11634
Hoda, R. S., Finer, E. B., Arpin III, R. N., Rosenbaum, M., & Pitman, M. B. (2019). Risk of malignancy in the categories of the Papanicolaou Society of Cytopathology system for reporting pancreaticobiliary cytology. Journal of the American Society of Cytopathology, 8(3), 120-127.https://doi.org/10.1016/j.jasc.2019.01.002
I.M. Franks and N. M. Teich (1997). Intrduction to the Cellular and molecular biology of cancer 3rd. Oxford University Press, 230.
Ikenberg H, Bergeron C, Schmidt D, Griesser H, Alameda F, Angeloni C, Bogers J, Dachez R, Denton K, Hariri J, Keller T, von Knebel Doeberitz M, Neumann HH, Puig-Tintore LM, Sideri M, Rehm S, Ridder R, PALMS Study Group (2013). Screening for cervical cancer precursors with p16/Ki-67 dual-stained cytology: results of the PALMS study. J Natl Cancer Inst. 105, 1550-7. https://doi.org/10.1093/jnci/djt235
Jeon S., Allen-Hoffmann B.L., Lambert P.F. (1995). Integration of human papillomavirus type 16 into the human genome correlates with a selective growth advantage of cells. J Viro 69(5). https://doi.org/10.1128/jvi.69.5.2989-2997.1995
Karin M. (2006). NF-κB and cancer: mechanisms and targets. Mol Carcinog, 355–361. https://doi.org/10.1128/jvi.69.5.2989-2997.1995
Kim WY, Sharpless NE (2006). The regulation of INK4/ARF in cancer and aging. Cell. 127(2), 265-275. https://doi.org/10.1016/j.cell.2006.10.003
Lewitowicz, P., Nasierowska-Guttmejer, A., Rokita, W., Adamczyk-Gruszka, O., Gluszek, S., Chrapek, M.& Misiek, M. (2020). HPV genotyping and p16/Ki-67 test significantly improve detection rate of high-grade cervical squamous intraepithelial lesion. Archives of Medical Science, 16(1), 87-93. https://doi.org/10.5114/aoms.2018.80697
Li, Y., Fu, Y., Cheng, B., Xie, X., & Wang, X. (2022). A comparative study on the accuracy and efficacy between dalton and CINtec® PLUS p16/Ki-67 dual stain in triaging HPV-positive women. Frontiers in Oncology, 11, 815213. https://doi.org/10.3389/fonc.2021.815213
Maurya, R., Pandey, N. N., & Dutta, M. K. (2023). VisionCervix: Papanicolaou cervical smears classification using novel CNN-Vision ensemble approach. Biomedical Signal Processing and Control, 79, https://doi.org/10.1016/j.bspc.2022.104156
Martinez-Mas, J., Bueno-Crespo, A., Martinez-Espana, R., Remezal-Solano, M., Ortiz-Gonzalez, A., Ortiz-Reina, S., & Martinez-Cendan, J. P. (2020). Classifying Papanicolaou cervical smears through a cell merger approach by deep learning technique. Expert Systems with Applications, 160, https://doi.org/10.1016/j.eswa.2020.113707
Martins, D., Schmitt, F., Frattini, M., Fulciniti, F. (2022). Molecular Pathology of Endometrial Carcinoma on LBC Samples and Cell Blocks. In: Hirai, Y., Fulciniti, F. (eds) The Yokohama System for Reporting Endometrial Cytology. Springer, Singapore. https://doi.org/10.1007/978-981-16-5011-6_16
Nishikawa, T., Suzuki, H., Takeuchi, M., Tatsumi, S., Tachibana, Y., Ohbayashi, C. & Norimatsu, Y. (2022). A study on preserving endometrial glandular architecture during preparation using BD SurePath™ liquid‐based cytology reagents: Cellular fixation with preservative fluid requires at least 18 h. Cytopathology, 33(3), 357-361. https://doi.org/10.1111/cyt.13087
Pennant S. (2008). Endometrial atypical hyperplasia and subsequent diagnosis of endometrial cancer. Obstet Gynaecol, 28 (6), 632-633. https://doi.org/10.1080/01443610802355817
Porras C., Rodriguez A.C., et al. (2009). Human papillomavirus types by age in cervical cancer precursors: predominance of human papillomavirus 16 in young women. Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev, 850-863. https://doi.org/10.1158/1055-9965.epi-08-0951
Raju, K. Evolution of Pap Stain. Biomed Res Ther 3, 6 (2016). https://doi.org/10.7603/s40730-016-0006-8
Roelens J, Reuschenbach M, von Knebel Doeberitz M, et al. (2012) p16INK4a immunocytochemistry versus human papillomavirus testing for triage of women with minor cytologic abnormalities: a systematic review and meta-analysis. Cancer Cytopathol. 120(5), 294–307. https://doi.org/10.1002/cncy.21205
Sarma, U., Sarma, P., & Rabha, D. (2023). Staining Intensity of P16INK4a and Ki-67 Determine the Grade of Cervical Lesion: An Experience from Single Tertiary Care Centre. Asian Pacific Journal of Cancer Biology, 8(4), 327-333. https://doi.org/10.31557/apjcb.2023.8.4.327-333
Schiffman M, Wentzensen N, Wacholder S, Kinney W, Gage JC, Castle PE (2011). Human papillo-mavirus testing in prevention of cervical cancer. Cancer Inst, 368-83. https://doi.org/10.1093/jnci/djq562
Schmidt D, Bergeron C, Denton KJ, et al. (2011) p16/ki-67 dual-stain cytology in the triage of ASC-US and LSIL papanicolaou cytology: results from the European equivocal or mildly abnormal Papanicolaou cytology study. Cancer Cytopathol.119(3),158– 166. https://doi.org/10.1002/cncy.20140
Silva, D. C., Goncalves, A. K., Cobucci, R. N., Mendonca, R. C., Lima, P. H., & Júnior, G. C. (2017). Immunohistochemical expression of p16, Ki-67 and p53 in cervical lesions–A systematic review. Pathology-Research and Practice, 213(7), 723-729. https://doi.org/10.1016/j.prp.2017.03.003
Smith J.S., Herrero R., Bosetti C., et al. (2002). Herpes simplex virus-2 as a human papillomavirus cofactor in the etiology of invasive cervical cancer, J Natl Cancer Inst.1604-1614. https://doi.org/10.1093/jnci/94.21.1604
Sung H, Ferlay J, Siegel RL, Laversanne M, Soerjomataram I, Jemal A. (2021). Global cancer statistics 2020: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries. CA Cancer J Clin.71, 209–49. https://doi.org/10.3322/caac.21660
Tesniere A, Panaretakis T, Kepp O, Apetoh L, Ghiringhelli F, Zitvogel L, Kroemer G. (2008). Molecular characteristics of immunogenic cancer cell death. Cell Death Differ, 15(1) 3–12. https://doi.org/10.1038/sj.cdd.4402269
Walboomers JMM, et al. (1999). Human Papillomavirus is a Necessary Cause of Invasive Cervical Cancer Worldwide. J. Pattol, 189. https://doi.org/10.1002/(sici)1096-9896(199909)189:1%3C12::aid-path431%3E3.0.co;2-f
White, C., Bakhiet, S., Bates, M., Keegan, H., Pilkington, L., Ruttle, C. & Martin, C. M. (2016). Triage of LSIL/ASC‐US with p16/Ki‐67 dual staining and human papillomavirus testing: a 2‐year prospective study. Cytopathology, 27(4), 269-276. https://doi.org/10.1111/cyt.12317
Wentzensen N, von Knebel Doeberitz M. (2007). Biomarkers in cervical cancer screening. Dis Markers. 23(4), 315-330. https://doi.org/10.1155/2007/678793
Wentzensen, N., Clarke, M. A., Bremer, R., Poitras, N., Tokugawa, D., Goldhoff, P. E. & Lorey, T. S. (2019). Clinical evaluation of human papillomavirus screening with p16/Ki-67 dual stain triage in a large organized cervical cancer screening program. JAMA internal medicine, 179(7), 881-888. https://doi.org/10.1001/jamainternmed.2019.0306
Wright Jr, T. C., Stoler, M. H., Ranger‐Moore, J., Fang, Q., Volkir, P., Safaeian, M., & Ridder, R. (2022). Clinical validation of p16/Ki‐67 dual‐stained cytology triage of HPV‐positive women: Results from the IMPACT trial. International journal of cancer, 150(3), 461-471. https://doi.org/10.1002/ijc.33812
Вовк, І. Б., Горбань, Н. Е., Борисюк, О. Ю. (2016). Гіперплазія ендометрію (клінічна лекція). Київ: ДУ «Інститут педіатрії, акушерства та гінекології НАМН України». Київ. Жіноче здоровья 7 (63), 177-181. http://nbuv.gov.ua/UJRN/Zdzh_2016_5_3.
Федоренко З.П. та інші. (2023). Бюлетень національного канцер-реєстру України № 24, 53. https:// www.ncru.inf.ua/publications/BULL_24/PDF/66-shm.pdf